complementtech R137說明書
名稱：因子H蛋白（大鼠）
目錄號：R137
可用規(guī)格：100µg/瓶
濃度：1.0 mg/mL（準確濃度見檢驗報告）
形態(tài)：液體
純度：> 90%（SDS-PAGE法）
緩沖液：10 mM磷酸鈉，145 mM NaCl，pH 7.3
消光系數(shù)A280 nm = 1.682(1.0 mg/mL)
分子量：155000 Da（單鏈）
豁免前：無，0.22µm過濾
儲存：-70 ℃
C或以下。避免凍融。
來源：來自健康動物的正常大鼠血清
預防措施：使用常規(guī)預防措施處理動物血液制品。
來源：美國生產。
從正常大鼠血清中純化大鼠（Rattus Norvegicus）補體因子H（fH）。H因子是補體替代途徑的重要調控成分。這對于防止宿主細胞和組織（尤其是腎臟）的補體激活至關重要。它具有兩個功能活性：1）控制替代途徑C3 / C5轉化酶的形成和衰減（衰減加速活性）； 2）作為I因子的輔因子，當C3b與H因子結合時，它通過蛋白水解作用使C3b失活（輔助因子活性）。據(jù)報道，C3b結合蛋白類似于從大鼠血漿中分離出的H因子，它是由大鼠血小板產生的，并起著免疫粘附受體的作用，可清除嚙齒動物中的免疫復合物（Alexander JJ等人（2001年））。
一般描述
大鼠（褐家鼠）補體因子H(fH)從正常大鼠血清中純化而來。因子H是補體替代途徑的重要調節(jié)成分。它對于預防宿主細胞和組織（尤其是腎臟）上的補體激活至關重要。它具有兩種功能活性：1）控制旁路途徑C3/C5轉化酶的形成和衰變（衰變加速活性），和2）作為因子I的輔因子，當C3b與因子H結合時，其蛋白水解使C3b失活（輔因子活性）。據(jù)報道，C3b結合蛋白與從大鼠血漿中分離的因子H相似，由大鼠血小板產生，并作為免疫粘附受體在嚙齒類動物中清除免疫復合物（Alexander J.J. et al.(2001))..(2001)).
因子H是由20個同源結構域組成的155000 Da蛋白，在半柔性串上像微珠一樣排列。N端5個結構域與C3b結合并抑制因子b的結合，從而減少C3/C5轉化酶的形成。因子H還與預形成的C3/C5轉化酶（C3b、Bb和C3b、Bb、C3b）結合，并引起催化亞基Bb的快速釋放（衰變加速）。這些活性對于控制血漿中替代途徑擴增過程的自發(fā)激活至關重要。此外，當C3b附著在顆粒表面時，因子H控制這些酶的形成和衰變。對宿主細胞有效，對外來顆粒效果較差，原因如下。補體的替代途徑是通過產生液相C3b樣C3(H2O)和C3b的“蜱”不斷激活。因子H可與這些蛋白結合并作為輔因子，使因子I（一種以活性形式循環(huán)的絲氨酸蛋白酶）可裂解其產生無活性蛋白（iC3b或iC3(H2O)）的α鏈。如果C3b不以這種方式失活，它繼續(xù)形成C3轉化酶，消耗因子b和C3。如果C3b附著在表面，則通過因子H和i以相似的方式轉化為iC3b。當C3b駐留在宿主細胞上時，由于因子H識別的宿主標記物的存在，因子H更有效。由于因子H識別的宿主特異性識別，補體介導的宿主損傷小化。
因子H似乎通過識別宿主標志物來調節(jié)潛在病原體與宿主細胞和組織之間的區(qū)分。連接到表面的C3b可以啟動替代途徑的擴增級聯(lián)。因子H在宿主細胞上阻止了這一點，并使其發(fā)生在不帶有宿主樣標記的表面。這些宿主特異性結構被認為是聚陰離子簇，如唾液酸和硫酸化糖胺聚糖。通過位于因子H結構域6-20的多個多陰離子結合位點識別宿主標志物。一個位點位于結構域7，該結構域的突變(Y402H)與年齡相關性黃斑變性中的補體激活和組織破壞密切相關（Zipfel,P.F. et al.(2006)).一個暫定位點位于結構域12-14區(qū)域，一個非常重要的位點位于結構域19-20的C-末端。該C-末端位點似乎是幫助結合宿主表面的主要位點。在遺傳性溶血性尿毒癥綜合征中，影響或位于這些結構域的突變導致補體替代途徑的激活（Zipfel,P.F. et al.(2006)).該位點似乎是參與聚陰離子依賴性二聚體和因子H四聚體形成的位點（Pangburn,M.K. et al.
(2009)).
物理特性和結構據(jù)報道，大鼠因子H的分子量約為150,000至155,000道爾頓(Daha MR et al.(1982)；Demberg Tet al.(2002)；Alexander JJ et al.，2001)。大鼠因子H的糖基化水平為9.5%（Demberg Tet al.,(2002)。在非還原和還原條件下通過SDS/聚丙烯酰胺凝膠電泳(Invitrogen)對純化的大鼠因子H（目錄號R137）進行分析，結果顯示有一條條帶略微早于人因子H（155,000道爾頓）遷移。使用ProtParam，根據(jù)其氨基酸序列計算大鼠因子H的消光系數(shù)(E1%/280 nm = 16.82)，并假設所有Cys殘基對均形成胱氨酸（即一對半胱氨酸分子通過二硫鍵連接）。根據(jù)其氨基酸序列計算的pI為6.29。Demberg Tet al.(2002)報告因子H大鼠血清的正常血漿濃度為238 + 21 μg/mL，而Daha MR et al(1982)報告為244 + 21 μg/mL。
功能參見上述一般描述。
分析H因子的功能試驗測量其衰變加速活性或I因子輔因子活性(Morgan,B.P.(2000))。已報告了連續(xù)監(jiān)測的熒光測定法(Pangburn,M.K. et al.(1983))，該方法利用存在C3b時ANS（8-苯胺基-1-萘磺酸）的熒光下降約8倍（當C3b轉化為iC3b時）。因子H的其他功能試驗見人因子H的含量測定章節(jié)（目錄號A137）。
使用方便的輔因子測定法（通過SDS凝膠測定純化C3b的裂解）測定純化大鼠因子H（目錄號R137）的輔因子活性。
在存在1µg人因子I（目錄號A138）的情況下，將4 μg(4 μg)大鼠C3b（目錄號R114）與不同量的大鼠因子H（目錄號R137，范圍為0.1至1µg，總體積為12µL）共同孵育。將試驗置于濕冰上，然后在37 ℃下孵育15 min，此時向試管中加入含還原劑的SDS樣品緩沖液，并將樣品加熱5 min。SDS凝膠分析顯示，在 > 0.02 μg大鼠因子H和1 μg人因子I存在的情況下，大鼠C3b的α鏈裂解 > 90%。
功能在上述一般描述章節(jié)中描述了因子H的生物學功能。
遺傳學大鼠因子H染色體位置13。大鼠因子H的NCBI基因ID編號為155012，UniProt登錄號為Q91YB6。
預防措施/毒性/危害：該蛋白從動物血漿/血清中提純，因此必須采用適用于處理任何動物血源性產品的預防措施。
危害代碼：B WGK Germany 3MSDS可根據(jù)要求提供。
CAS登記號：80295-65-4
